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核酶与核酸酶、核糖与脱氧核糖、cDNA与gDNA……一字之差却大有不同!

在医学检验技术与分子生物学术语当中,经常会遇见一些看似相似但意义却完全不同的词语,小编例举了五组:1、核酶与核酸酶2、核糖与脱氧核糖3 、DNA、cDNA 和gDNA、4、血浆与血清5、PCR、RT-PCR 、 qPCR、Real-time PCR、 real-time RT-PCR(或 RT-qPCR)。那么,它们的意义有何不同?都是什么含义呢?

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核酶与核酸酶

核酶是具有催化活性的RNA,
即化学本质是RNA。核酶的功能很多,包括切割RNA、切割DNA,、连接RNA、磷酸酶活性等。与蛋白质酶相比,核酶的催化效率较低,是一种很原始的催化酶。核酶可降解特异的mRNA序列。它的发现打破了酶是蛋白质的传统观念。有一些RNA分子同样具有催化功能。
核酶的作用主要有:
1. 核苷酸转移作用。
2. 水解反应,即磷酸二酯酶作用。
3. 磷酸转移反应,类似磷酸转移酶作用。
4. 脱磷酸作用,即酸性磷酸酶作用。
5. RNA内切反应,即RNA限制性内切酶作用。

核酶

核酸酶包括核酸外切酶和核酸内切酶、核酸连接酶,不同来源的核酸酶,其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA,称为核糖核酸酶,有些核酸酶只能作用于DNA,称为脱氧核糖核酸酶,有些核酸酶专一性较低,既能作用于RNA也能作用于DNA,因此统称为核酸酶。根据核酸酶作用的位置不同,又可将核酸酶分为核酸外切酶和核酸内切酶。主要作用于DNA和RNA,起到连接、切割DNA或RNA中碱基序列的作用,其本质一般为蛋白质。因此,核酶和核酸酶的主要区别就是核酸酶为蛋白质成分,可分解核酸;而核酶成分为RNA,起到微弱的核酸酶活性。
核糖与脱氧核糖
化学结构及功能不同:
核糖是一种戊醛糖,分子式C5H10O5,它是RNA的重要组成部分。
脱氧核糖,分子式C5H10O4,是分子中氢原子数和氧原子数不符合2∶1的一种戊醛糖,它是DNA的重要组成部分。

核糖与脱氧核糖结构式

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DNA、cDNA 和gDNA

DNA是生物体的主要遗传物质,单体脱氧核糖核酸聚合而成的聚合体,内部有内含子等结构,携带合成RNA和蛋白质所必需的遗传信息,是生物体发育和正常运作必不可少的生物大分子。
cDNA是与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,经过反转录过程合成的DNA,其内部无内含子等结构,基因克隆中有利于原核生物中的表达。
gDNA是指有机体在单倍体状态下的DNA全部含量。广义的基因组也指某一体系中的DNA,它包括编码或细胞中固有的核糖体DNA、线粒体DNA、tRNA基因及其它RNA编码。

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血浆与血清

定义

血浆是新鲜血液的主要成分,在血浆的化学成分中,水分比例相当高,可达到92%,溶质以血浆蛋白为主。
血清是离体的血液凝固后1~2小时,血凝块会发生回缩,释出淡黄色液体,这个液体就是血清。

密度、成分、功能均有所不同

血浆包含很多蛋白质,如白蛋白、球蛋白,还有凝血因子。在血液凝固的时候,需要血浆中凝血因子以及钙离子参与,血清当中不含有凝血因子,因此血浆的密度比血清大。在成分上,血清没有凝血因子,不含纤维蛋白原。血浆里含有纤维蛋白原。
临床上可以用血浆补充蛋白质和凝血因子,当患者有凝血功能障碍出血不止时,通常会用血浆输注。血清富含免疫球蛋白,俗称抗体,所以提取抗体时用血清。血清主要用于血液生化、免疫等方面的检测;血浆主要用于凝血方面的检测。
血浆和血清
血液是由血细胞和血浆组合的,在血浆中过滤掉纤维蛋白原等凝血因子剩下的便是血清。血浆里含有血清和血细胞,但是血浆与血清的功效是不同的,血浆与血清是两种元素。

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PCR、RT-PCR 

qPCR、Real-time PCR、

real-time RT-PCR(或 RT-qPCR)

聚合酶链式反应(PCR)是一种用于扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,被看作是生物体外的DNA复制,将微量的DNA片段进行大幅扩增,从而达到容易鉴定和识别的程度。
RT-PCR 是逆转录PCR或者称反转录 PCR,是PCR应用的变形。在 RT-PCR 中,一条 RNA链被逆转录成为互补 DNA,再以此为模板进行PCR 扩增。
RT-PCR一步法
Real-time-PCR 和 qPCR(Quantitative Rea-time PCR)含义是一样的,都是实时荧光定量 PCR,指的是PCR 过程中每个循环都有数据的实时记录,可以对起始模板数量进行精确分析。
real-time RT-PCR(RT-qPCR)就是结合了荧光定量技术的反转录。先从 RNA 反转录得到cDNA(RT),然后再进行实时荧光定量PCR(qPCR)。因为 RT-PCR 是可以定性的,但不能进行定量检测的。因此,qPCR不仅可以用 cDNA 作为模板,也可以用基因组 DNA 作为模板。
一步法与两步法RT-qpcr
上文列举的词语当中,有的只有一字之差,但含义却完全不同。这就需要时刻保持学习的态度,能够分辨、了解这些相似词语,不断扩充自己的知识库,这样才能在检验工作中不断进步。


来源: MIR医学仪器与试剂 

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